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C18液相色谱柱安装方法 使用需要注意什么

发布时间:2019-04-30 17:56 发布人:技尔C18
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  C18液相色谱柱是一种常用的反相色谱柱,它以十八烷基硅烷键合硅胶为填料,因此有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力。今天技尔小编给你说下色谱柱是如何安装的,使用注意事项。

  色谱柱的安装

  1、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

  2、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

  3、 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈,切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。

  使用注意事项

  1、C18液相色谱柱在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到更好状态。具体操作是,将配制好65%的乙腈/水冲洗后,把色谱柱进口端连接在色谱仪上,出口端放空(不可连上检测器,以免污染了检测器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干,过20分钟后再接上检测器,以1.0ml/min的流速,继续冲洗2~8小时。

  2、若C18液相色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗3-4小时以上,后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液中。

  3、液相色谱仪检测分析样品完毕后,须冲洗c18反相液相色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时,需将c18反相液相色谱柱中的酸或盐冲洗干净,通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积。

C18液相色谱柱

  4、C18液相色谱柱压力升高、柱性能下降:通常为色谱柱被污染,对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效。

  5、由于c18反相液相色谱柱的固定相疏水性较强,在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响;由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过90%。

  6、C18液相色谱柱压力骤升:通常由盐析出或筛板堵塞引起,若是盐析出,用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可;若判断并非盐析出,以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱(将色谱柱反接,不接检测器),若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效,需寻找其他原因。

  技尔(上海)商贸有限公司是由日本GL Sciences出资,在中国设立的分公司。技尔(上海)与总公司GL Sciences一样,也将致力于为广大客户提供液相,inertsil,C18液相色谱柱各类色谱柱产品,帮助客户解决在分析化学领域遇到的各种问题。

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